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细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)一般是指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下,通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡(programmed cell death)。细胞凋亡对胚胎发育及形态发生(morphogenesis)、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进展起着重要作用,并具有潜在的治疗意义。

关键词:

流式细胞术

细胞

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详情描述

细胞凋亡实验


一、实验介绍:

  细胞凋亡(apoptosis)一般是指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下,通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡(programmed cell death)。细胞凋亡对胚胎发育及形态发生(morphogenesis)、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进展起着重要作用,并具有潜在的治疗意义。

  在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC、APC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

  PI和7-AAD是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI(或7-AAD)能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI(或7-AAD)匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

 

二、实验目的:

检测细胞凋亡率。

 

三、实验步骤:

1

 

四、实验结果展示:

1

 

五、送样运输要求:

  武汉市内送样,细胞量不低于1*106,流式检测样品需提供荧光信息,如果细胞带荧光,一定要在交接单和培养板上备注,否则按照无荧光处理,如果因此导致检测结果不可用及样本浪费,我方概不负责,也不接受退单。

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