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CCK8检测实验

Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

关键词:

细胞

培养基

实验

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详情描述

CCK8检测实验


一、实验介绍

  Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

  

二、实验目的

  1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;

  2.细胞增殖及细胞活性测定。

 

三、实验步骤:

1

 

四、结果展示:

 

20230905132042

 

 

五、送样运输要求

 

1 冻存细胞

冻存管寄送前,使用封口膜把冻存管口封严密,冻存管单独用自封袋存放。干冰运输。运输时间在2天以内干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。

2 活细胞

  1. 使用T25瓶,瓶盖无孔。
  2. 生长状态良好的细胞,细胞密度在30%-40%为宜,寄送前,移去瓶内旧培养基,添加新培养基至瓶颈部,保留微量空气,拧紧瓶盖,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用无菌袋或自封袋包装,然后放置在适当的盒内,盒周围用棉花等做防震防压处理。当温度低于10度是要加保温措施,如暖宝宝等。
  3. 细胞培养条件备注完整,如培养基,培养温度,FBS用量等。
  4. 备注:运送时间原则在4天以内,如细胞生长速度快,则加入的培养基血清可以减半,细胞密度在20%-30%。

 

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