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流式EDU检测实验

一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Click reaction)使EdU被Alexa Fluor 488/647所标记,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。EDU加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含EDU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。

关键词:

流式细胞术

细胞

实验

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详情描述

细胞流式EDU实验


一、实验介绍

  一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Click reaction)使EdU被Alexa Fluor 488/647所标记,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。EDU加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含EDU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期,则染色体中约一半为两条单体均浅染,另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期,则两条单体均深染。计分裂相中各期比例,就可算出细胞周期的值。

  

二、实验目的

  比BRDU更准确快速的测定细胞增殖速度。

  

三、实验步骤

  

1

 

四、实验结果展示

  

1

 

五、送样运输要求:

  活细胞样本常温运输;

  新鲜组织样本需要浸泡在生理盐水中4℃运输;

  客户提供组织、细胞信息,不接收冻存样本。

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