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EMSA实验
凝胶迁移或电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay)，简称EMSA：是一种用于研究核酸和蛋白质之间相互作用的技术，适用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，主要是验证蛋白质与特定核酸序列的结合特性，从而间接推断已知蛋白质的靶序列或已知序列的结合蛋白质分子。
关键词：
实验
相互作用
结合
所属分类：
详情描述
EMSA实验
一、实验介绍：
凝胶迁移或电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay)，简称EMSA：是一种用于研究核酸和蛋白质之间相互作用的技术，适用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，主要是验证蛋白质与特定核酸序列的结合特性，从而间接推断已知蛋白质的靶序列或已知序列的结合蛋白质分子。
二、实验目的：
研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,用于验证基因的反式作用因子与顺式作用元件如转录因子与启动子的互做关系。可用于定性和定量,也可用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
三、实验步骤：
探针设计合成-样本制备-预电泳-电泳-转膜-紫外交联-封闭-抗体孵育-洗脱-化学发光-结果分析
四、结果展示：
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加入样品 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
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阴性对照 |
C |
C+R |
C+L |
C+R+L |
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WT-biotin |
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√ |
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核蛋白 |
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√ |
√ |
√ |
五、送样运输要求：
新鲜组织，100mg（黄豆大小）以上，干冰运输。
细胞量要求为10^7以上，收集细胞沉淀，干冰运输。
抗体要求为EMSA级别，-20或者4℃运输
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