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鬼笔环肽染色实验
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合，通过藕联的荧光素分子，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比，鬼笔环肽无物种限制，染色特异性极强，染色区和未染色区对比性非常清晰，而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
关键词：
染色
鬼笔
环肽
所属分类：
详情描述
鬼笔环肽染色实验
一、实验介绍
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合，通过藕联的荧光素分子，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比，鬼笔环肽无物种限制，染色特异性极强，染色区和未染色区对比性非常清晰，而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
二、特点及适用范围
细胞学、生物学、病理学教学与科研。
三、细胞爬片鬼笔环肽染色实验步骤
1.在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；
2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，PBS浸洗玻片3次，每次3min；
3.滴加稀释好的鬼笔环肽染液（5μg/mL），37℃孵育1 h，PBST清洗3次，每次3 min；
4.滴加DAPI避光孵育5min，对标本进行染核，PBST 5min×4次洗去多余的DAPI；
5.用吸水纸吸干爬片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，然后在荧光显微镜下观察采集图像。
四、实验结果展示
五、送样运输要求：
按细胞准备流程4%的多聚甲醛固定固定细胞15min后用无菌PBS洗涤后用无菌PBS浸泡，离心管封口膜封好，4℃冰袋保存运输到实验室
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